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ELISA試劑盒步驟及原理

點擊次數:1109次 更新時間:2016-11-30

ELISA試劑盒步驟及原理

      基本原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的ENA-78會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結合在包被抗體上的Mouse ENA-78結合、與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入發光底物混合液,發光底物在辣根過氧化物酶的催化下發出熒光,用化學發光免疫分析儀測定化學發光值(CL),ENA-78濃度與化學發光值之間呈正相關,通過繪制標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。

操作步驟:

1、在各孔中加入標準品或樣品各 100μL,37℃孵育90分鐘

2、倒去孔內液體,拍干,加入 100μL  化抗體工作液,37℃孵育 60 分鐘

3、洗滌 3 次

4、加入 100μL 酶結合物工作液, 37℃孵育 30 分鐘

5、洗滌 5 次

6、加入 100μL 底物溶液, 37℃孵育 5 分鐘左右

7、讀數

基本原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗Mouse ENA-78抗體包被于酶標板上,實驗時標本或標準品中的ENA-78會與包被抗體結合,游離的成分被洗去。依次加入化的抗Mouse ENA-78抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗Mouse ENA-78抗體與結合在包被抗體上的Mouse ENA-78結合、與親和素特異性結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入發光底物混合液,發光底物在辣根過氧化物酶的催化下發出熒光,用化學發光免疫分析儀測定化學發光值(CL),ENA-78濃度與化學發光值之間呈正相關,通過繪制標準曲線求出標本中ENA-78的濃度。

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